 Bioline Salmonella SELECTA  flyer_v2.pdf |  Salmonella Guide.doc
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NordVal와 AFNOR에서 공인됨.
모든 종류의 식품, 사료, 물과 생물학적 위해
샘플에서 Salmonella spp.의 검출.
 검출 한계: 10 5 - 10 6 cell/㎖
신속한증균 : 24시간배양 |
검사
1) 샘플의 증균
- 증균 배지의 준비
BPW를 깨끗한 물에서 회전 자석으로 용해시키고, 15분 동안 121℃에서 가압 멸균한
한 후 식히며,
샘플에 적용하기 전에 6시간 또는 하루 동안 37℃에서 pre-warm 한다.
Bioline SELECTA 배지를 깨끗한 물에서 회전 자석으로 용해시키고(물 1kg에 배지
29.3g 사용),
15분 동안 끓이거나 115℃에서 가압 멸균한다.
적당한 튜브에 200㎖를 분주
한 후 41.5℃에서 6시간 또는 하루 동안 평형 시킨다.
- 샘플의 준비
>>사전 증균
검사할 샘플의 25g을 균질화시키고, pre-warm된 BPW의 225㎖에서 37℃로 6-10
시간 동안 배양한다.
>>선택적인 증균
증균 샘플의 20㎖를 pre-warm된 SELECTA 배지의 200㎖에 옮기고, 41.5℃에서
18-24시간 동안 배양한다.
샘플을 재부유 시키고 튜브에 1㎖를 옮기고, 15-20분 동안 85-100℃에서 가열
후에 실온에서 식힌다.
2) ELISA 검사
① 첫 웰은 기질액과 반응정지액의 흡광도를 측정하기 위하여 비워둔다.
② 검체 분주: 둘째 웰에 음성대조액, 셋째 웰에 양성 대조액을 100㎕씩 분주한다.
다음 웰에 준비된 샘플을 각각 100㎕씩 분주한다.
③ 배양: 웰을 봉하여 35-37℃에서 30분간 배양한다.
④ 세척: 5-7번 웰을 세척한다.
⑤ 분주: 첫 웰(빈웰)을 제외한 모든 웰에 컨쥬게이트를 100㎕ 분주한다.
⑥ 배양: 웰을 봉하고 37℃에서 30분간 배양한다.
⑦ 세척: 웰을 5-7번 세척한다.
⑧ 분주: 모든 웰에 TMB 기질액을 100㎕씩 분주한다.
⑨ 배양: 웰을 실온에서 15분 동안 배양한다.
⑩ 분주: 모든 웰에 반응 정지액을 100㎕씩 분주한다.
⑪ 판독: 판독기를 이용하여 450nm에서 10분 안에 판독한다.
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* Salmonella SELECTA : AFNOR와 NordVal 승인됨
24시간 증균 후 1시간 15분 검사
* Salmonella OPTIMA : AOAC, AFNOR, NordVal 승인됨
40시간 증균 후 1시간 15분 검사
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